Biología (Trabajo de suficiencia profesional)

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    Implementación del método de la Klebsiella para el cultivo de Campylobacter sp. en muestras de heces de pacientes pediátricos de enero a julio de 2023 en el laboratorio de microbiologia del Hospital María Auxiliadora
    (Universidad Nacional Federico Villarreal, 2024) De la Torre Astete, José Carlos; Rodrigo Rojas, María Elena
    Campylobacter es una de las principales causantes de enfermedades diarreicas en pacientes pediátricos y la más común de gastroenteritis. En las últimas décadas especies de Campylobacter han adquirido gran importancia en la salud pública, Campylobacter jejuni es la más frecuente relacionado a cuadros diarreicos en pacientes pediátricos y posible causante del síndrome de Guillian- Barré. Hoy en día existen algunos métodos para la identificación de Campylobacter, un ejemplo es la tinción gram modificada que se realiza utilizando fucsina básica como colorante final, este nos permite observar la morfología bacteriana y obtener un diagnóstico presuntivo rápido. Sin embargo, si uno no cuenta con la suficiente experiencia podría no reconocer esta bacteria y pasar desapercibida, debido a esto la implementación del cultivo de Campylobacter por el método de la Klebsiella para la identificación presuntivamente de Campylobacter y así posteriormente hacer una confirmación con pruebas complementarias para seguir con una vigilancia de sensibilidad a antibióticos y tener un resultado óptimo que permita un manejo más rápido con bajos costos tanto para el laboratorio y paciente. Este método es una alternativa para potenciar la eficacia del estudio en muestras de heces en pacientes pediátricos y reducir costos de implementación para rastrear a esta bacteria con mayor eficiencia en base a limitación de insumos y reactivos. Se evaluaron 249 muestras de heces obtenidas de pacientes pediátricos con reacción inflamatoria positiva en el periodo de enero a julio del 2023 en el laboratorio del Hospital María Auxiliadora obteniendo 63 casos positivos (25.30%) para Campylobacter sp.
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    Monitoreo microbiologico del sistema de agua utilizada en la fabricación de productos de limpieza del hogar durante el periodo 2021 al 2023
    (Universidad Nacional Federico Villarreal, 2024) Arce Alania, Rodrigo Alfredo; Rodrigo Rojas, María Elena
    Los sistemas de osmosis inversa (OI) se han establecido como una tecnología esencial en la industria para la producción de agua de alta calidad. Sin embargo, a pesar de sus ventajas, los sistemas OI están sujetos a diversos desafíos, entre los que se destaca la contaminación microbiana, siendo el impacto más preocupante, el riesgo de la bioincrustación por la formación de biofilms que pueden obstruir los poros de membrana, disminuyendo su capacidad de filtración y afectando el rendimiento del sistema. Además, estos microorganismos presentes pueden liberarse en el agua producida, comprometiendo su calidad microbiológica y representando un riesgo para la salud pública. Es por ello, que el presente informe describe el monitoreo microbiológico realizado en una planta donde se elaboran productos de limpieza para el hogar y resalta la importancia de contar con un procedimiento de limpieza y sanitización para evitar posibles problemas de contaminación. Para lo cual, a solicitud del cliente, se llevó a cabo el procedimiento de toma de muestras de agua, seguido de un análisis microbiológico utilizando la metodología establecida por la United States Pharmacopeia (USP). Obteniendo como resultado una fluctuación en la presencia tanto de microorganismos aerobios como de Pseudomonas aeruginosa, lo que nos permite concluir sobre la relevancia de implementar un programa integral de limpieza y sanitización para prevenir la contaminación de membranas, tanques y/o tuberías ocasionadas por la formación de biofilms.
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    Verificación del Método AOAC 2016.08. Detección Molecular de Listeria Monocytogenes en Embutidos con Tratamiento Térmico
    (Universidad Nacional Federico Villarreal, 2023) Gonzales Cometivos, Marcos; Salas Asencios, Ramsés
    Objetivo: Verificar el método AOAC 2016.08. Detección Molecular de Listeria monocytogenes en la matriz embutidos con tratamiento térmico. Método: La verificación de la metodología se realizó siguiendo las recomendaciones de las normas ISO16140-2 e ISO16140-3. Resultados: Se logró detectar el 100% de las muestras inoculadas con Listeria monocytogenes. La sensibilidad, especificidad y exactitud relativa fueron de 100%, mientras que los falsos positivos y falsos negativos obtuvieron valores de 0%. El límite de detección estimado fue <2.3 ufc/25g. Conclusiones: El método es sensible, específico, preciso y exacto. El laboratorio demostró que tiene la capacidad de ejecutar el método de ensayo de forma correcta y emitir resultados confiables.
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    Diagnóstico de cumplimiento de la NTP- ISO 15189:2014 al laboratorio clínico de la Clínica Universitaria del Norte en el distrito de Comas
    (Universidad Nacional Federico Villarreal, 2022) Quispe Jaque, Evelyn Lissette; López Bulnes, Jorge
    Objetivo: Evaluar el porcentaje de cumplimiento de la NTP-ISO 15 189:2014 del laboratorio clínico de la clínica universitaria del norte en el distrito de Comas, para lo cual se desarrolló en un tiempo definido describiendo la situación actual del laboratorio clínico. Metodología: Se utilizó como herramienta la lista de verificación NTP ISO 15189:2014 que maneja el instituto nacional de calidad (INACAL) y que mantiene un orden de secuencia lógica basada en la norma, a través de preguntas concretas se obtuvo una idea panorámica del cumplimiento o no de los requisitos de gestión de control de calidad. La metodología empleada fue no experimental, diseño transversal, exploratoria y descriptiva. Se analizaron a través de una escala de valoración. El trabajo se dividió en dos partes, en la primera sección se analizaron 15 requisitos de gestión y en la segunda sección 08 requisitos técnicos. Resultados: Se halló de la media de los porcentajes entre requisitos de gestión (23.50%) y requisitos técnicos (36.30%), obteniendo el 29.90 % de cumplimiento de la NTP ISO 15189:2014. Conclusión: En el presente estudio de diagnóstico nos muestra que existe intención en sus actividades para el cumplimiento de la norma, pero no existe un sistema de gestión de calidad estructurado y sostenido. Se remite la investigación a la alta dirección para el inicio de una futura acreditación.
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    Método automatizado VIDAS para la detección de Salmonella sp. proveniente de alimentos en un laboratorio de análisis microbiológico (Callao)
    (Universidad Nacional Federico Villarreal, 2023) Espinal Vascones, Tessy Antonia; Salas Asencios, Ramsés
    Las enfermedades de transmisión alimentaria (ETA’s) representan un problema en la salud pública a escala mundial. La bacteria Salmonella sp. desencadena una enfermedad de transmisión alimentaria que toma gran relevancia debido a que el cuadro de salmonelosis desarrolla síntomas variados desencadenando casos de mortalidad. En la industria de alimentos, se requieren que los métodos de detección de microorganismos sean automatizados y rápidos para abordar gran cantidad de muestras sin afectar su fiabilidad; para ello, en el laboratorio de Microbiología de S.G.S se utiliza un método automatizado para la detección de Salmonella sp. llamada VIDAS (Vitek Immunodiagnostic Assay System), un método de inmunoensayo enzimático que se basa en la especificidad y afinidad de un anticuerpo monoclonal, detectando secuencial y automáticamente a Salmonella sp. Siguiendo el método VIDAS, se procesan diariamente lotes de muestras de harina de pescado (y otros alimentos), obteniendo resultados en al menos diecinueve horas, ahorrando tiempo y costo, siendo, esto una de las ventajas más resaltantes frente a otros métodos de detección de Salmonella sp., además de la disminución del riesgo de contaminación, ya que la naturaleza de la técnica no requiere de mayor manipulación y se encuentra validado por Organizaciones internacionales como ISO y AOAC.
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    Uso de AOAC official method 2016.01 para la detección de salmonella
    (Universidad Nacional Federico Villarreal, 2022) Bravo Almeida Julian Jeanpaul; Salas Asencios, Ramsés
    En el 2020, la Unión Europea notificó un total de 1025 casos de alimentos contaminados por microorganismos patógenos, siendo Salmonella el patógeno más frecuente en alimentos dentro de los países miembros, con 537 notificaciones, de las cuales 149 se referían a Salmonella enteritidis. Además, se encontró Salmonella en pimienta negra de Brasil (61 notificaciones) y semillas de sésamo de otros países no miembros (49 notificaciones). Hubo un aumento del 37% en las notificaciones de microorganismos patógenos en 2020 en comparación con 2019 dentro de los países miembros. En respuesta, 3M® desarrolló el método "3M MDA 2-Salmonella", que permite la detección rápida y específica de Salmonella en alimentos fortificados, piensos y muestras ambientales de procesamiento de alimentos mediante amplificación isotérmica mediada por bucle (LAMP) con alta especificidad y sensibilidad. El método 3M MDA 2-Salmonella se comparó con otros métodos oficiales como el ISO 6579 y el método descrito por la Norma 62 del Ministerio de Agricultura, Pecuaria y Abastecimiento de Brasil (MAPA), y se encontró que era confiable con sensibilidad y especificidad equivalentes. La propiedad isotérmica del sistema 3M permite que la polimerasa trabaje a temperaturas más bajas, lo que permite que el pirofosfato se convierta en ATP para reaccionar con la luciferasa, dando como resultado la producción de luz, y es una ventaja en comparación con técnicas más convencionales como PCR y real. PCR a tiempo
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    Uso del método de Detección Genética Assurance GDS™ para la detección de Salmonella spp. en alimentos, en un laboratorio de servicios de análisis microbiológicos (Callao)
    (Universidad Nacional Federico Villarreal, 2022) Grundy Linares, Elena Erika; Salas Asencios, Ramsés
    La industria de alimentos enfrenta diversos retos en el proceso de fabricación de productos inocuos para el ser humano. Uno de los principales inconvenientes que se presentan en esta industria y que además genera importantes pérdidas, es la contaminación bacteriana, especialmente con agentes patógenos como el género Salmonella, que según la Organización Mundial de la Salud es una de las cuatro principales causas de enfermedades diarreicas en seres humanos. Debido a la gran incidencia de este patógeno, las industrias de alimentos requieren de servicios rápidos y confiables para la detección de los mismos. Una alternativa a los métodos tradicionales de detección de Salmonella spp., son los métodos de detección genética, que son altamente sensibles y que además proporcionan resultados mucho más rápidos. Se describe el uso y las ventajas del sistema Assurance GDSTM, aplicado al análisis de alimentos (Productos hidrobiológicos, frutas y hortalizas) en un laboratorio de servicios de análisis microbiológicos, teniendo como referencia la metodología aplicada en la norma AOAC Official Method 2009.03.
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    Zonificación y priorización del potencial de recursos naturales en la zona de influencia del Parque Nacional Alto Purus y area colindante de la Reserva Territorial Madre de Dios
    (Universidad Nacional Federico Villarreal, 2022) Gálvez Durand Besnard, Claudia María; Bohorquez Meza Isabel Doris
    El presente informe muestra parte de la experiencia laboral obtenida durante tres años y medio de trabajo en la región Madre de Dios como coordinadora del proyecto “Estrategia Indígena para la Acción Climática en los bosques de Madre de Dios” implementado en los bosques de las comunidades nativas bases de la Federación Nativa del río madre de dios y Afluentes –FENAMAD, en la zona de influencia del Parque Nacional Alto Purús y la Reserva Territorial Madre de Dios. La intervención en el área tuvo como objetivo identificar e implementar acciones de mitigación y adaptación al cambio climático a través del ordenamiento del uso de los recursos naturales en los territorios de comunidades nativas. El presente informe se centra a describir el proceso de zonificación de los bosques comunales que incluye la identificación de especies de fauna y flora así como ecosistemas de mayor importancia para posteriormente definir acciones de manejo sostenible en el marco del escenario actual de cambio climático. Para lograr este objetivo se reconoce la importancia de los conocimientos tradicionales y actuales de la población indígena sobre su territorio y recursos naturales
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    Métodos bacteriológicos utilizados en el diagnóstico de tuberculosis multidrogoresistente en pacientes de Lima Metropolitana
    (Universidad Nacional Federico Villarreal, 2022) Ríos Gutiérrez, Lidabel Marina; Salas Asencios, Ramsés
    El diagnóstico bacteriológico de la tuberculosis ha venido siendo uno de los pilares básicos para combatir la enfermedad. El tamizaje de la población sintomática respiratoria mediante la realización de la baciloscopía y sembrado del esputo descontaminado en medios de cultivo líquido y sólido, permiten diagnósticos certeros y ofrecen la posibilidad de un seguimiento de la enfermedad durante el tratamiento que asegure la curación. Sin embargo, a pesar de la utilidad de estos exámenes sumados a la incorporación progresiva de pruebas de susceptibilidad a los fármacos, la tuberculosis continúa siendo hoy en día una epidemia. El objetivo de este trabajo es comparar los métodos bacteriológicos utilizados en el diagnóstico de la tuberculosis multidrogo-resistente en pacientes de Lima Metropolitana para implementar un método que acorte el tiempo de detección y favorezca la rapidez en la emisión del resultado. Para ello se procesan un total de 106 muestras de esputo crudo por el método NALC-NaOH y con el pellet concentrado se hace un extendido en lámina y se realiza un sembrado en medios de cultivo y de la mayor carga bacilar se realiza la extracción de ADN para el diagnóstico molecular. Los resultados del Genotype 1L presenta una mayor tasa de detección frente a los otros métodos de diagnóstico permitiendo la detección rápida y la rapidez del resultado.
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    Implementación del ensayo Xpert MTB/RIF a 30 establecimientos de salud a nivel nacional entre los años 2018-2019
    (Universidad Nacional Federico Villarreal, 2021) Giraldo Chávez, Jorge Amílcar; Salas Asencios, Ramsés
    La tuberculosis es una enfermedad infecciosa de suma importancia en la salud mundial sobre todo por la aparición de cepas resistentes a fármacos como es el caso de la resistencia a rifampicina e isoniazida, fármacos principales en el tratamiento antituberculoso, que es un gran problema en aumento en el Perú. En la actualidad existen diferentes métodos para el diagnóstico y susceptibilidad, sin embargo, la mayoría tiene un tiempo prolongado de entrega de resultados, poca accesibilidad a los pacientes por ser muy costoso o estar en laboratorios especializados por las exigencias propias de la metodología; en el 2010 un nuevo método molecular fue recomendada por la organización mundial de la salud como una alternativa para el diagnóstico de la tuberculosis y de manera simultánea en la detección de la resistencia a la rifampicina creado por Cepheid, el ensayo Xpert MTB/RIF, es un PCR en tiempo real, de fácil manejo, portabilidad y muy accesible a poblaciones alejadas. En el 2018 el instituto Nacional de Salud conjuntamente con la Dirección de Prevención y Control de la Tuberculosis realizan las coordinaciones para la implementación de este ensayo a 30 establecimientos de salud a nivel nacional que acabó a finales del 2019. La implementación del ensayo Xpert MTB/RIF se realizó de manera satisfactoria obteniendo a finales del primer trimestre del 2020 en 20 (44%) establecimientos se obtuvo una producción mayor al 30% y en 10 (37%) establecimientos una eficiencia mayor al 30%, la gran mayoría tiene una producción y eficiencia entre 10% a 29%. Existen muchas brechas por cerrar como es el caso de transporte de muestras, una mejor socialización de la metodología, mejorar el sistema de cómputo y la implementación en el sistema de reporte en el NetLab y finalmente incluir otras poblaciones en los algoritmos usados en la metodología.
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    Ingeniería genética de levadura y su aplicación biotecnológica para biorremediación de mercurio
    (Universidad Nacional Federico Villarreal, 2021) Fuentes Rivera Navarro, Jessica Paola; Salas Asencios, Ramsés
    El objetivo del presente informe es presentar una revisión respecto a la ingeniería genética realizada en levadura y su aplicación biotecnológica para biorremediación de mercurio. Los organismos vivos están expuestos a niveles tóxicos de iones metálicos provenientes principalmente de actividades antropogénicas, las cuales producen y descargan residuos conteniendo diferentes metales pesados en el medio ambiente. El mercurio es uno de los metales pesados más tóxico, incluso en bajísimas concentraciones, al igual que otros metales tóxicos es difícil de eliminarlo del medio ambiente, ya que no puede degradarse química o biológicamente. Por consiguiente, la contaminación por mercurio es uno de los principales problemas ambientales y de riesgo para la salud humana. En las últimas décadas con los avances en biotecnología, la biorremediación utiliza microorganismos como biosorbentes para la remoción de metales pesados tóxicos de efluentes o aguas residuales industriales. Entre los biosorbentes, la levadura Saccharomyces cerevisiae es un organismo útil porque se puede cultivar fácilmente en un medio de cultivo de bajo costo, la biomasa es fácilmente obtenida a partir de industrias de fermentación y se puede manipular fácilmente a nivel molecular. Asimismo, la ingeniería genética es una herramienta atractiva para mejorar la adsorción de iones metálicos en levaduras, faciltando de esta forma la remoción de metales pesados tóxicos que contaminan el medio ambiente.
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    Uso de la Técnica LAMP ICGENE para descarte de SARS COV-2 en superficies de productos hidrobiológicos
    (Universidad Nacional Federico Villarreal, 2022) Salirrosas Rodríguez, Julissa Ysabel; Salas Asencios, Ramsés
    Se desarrolló la implementación de la técnica LAMP mediante el uso del equipo LAMP ICGENE de Embiotech para el descarte de SARS COV-2 en superficies de contacto de productos hidrobiológicos en el Laboratorio de Microbiología en la empresa Intertek. Lamp ICGENE es una técnica molecular de amplificación isotérmica mediante blucle. Se trata de un amplificador y lector de fluorescencia en tiempo real que, a través de una interfaz Android de fácil manejo, guía al operador en el desarrollo de las actividades a realizar. Contiene un kit de identificación de SARS COV-2, el análisis se llevó a cabo en una cámara de flujo laminar con todos los materiales necesarios y procedimiento que se detalla a lo largo del informe. En conclusión, esta técnica resultó ser mucho más práctica, simple y de bajo costo en comparación con el método tradicional de PCR. Brinda una facilidad en su implementación y con ello un servicio más de calidad ante la coyuntura de la pandemia del coronavirus.